Transformación del hongo fitopatógeno Sclerotium cepivorum Berk empleando fusión de protoplastos

Autores/as

  • Gerardo Acosta-García Departamento de Ingeniería Bioquímica, Instituto Tecnológico de Celaya, Av. Tecnológico y A. García Cubas S/N, Celaya, Guanajuato, México, C. P. 38010. Tel. 01 461 6117575, Ext. 324 y Fax, Ext. 402
  • Miguel Ángel Pantoja-Hernández Departamento de Ingeniería Bioquímica, Instituto Tecnológico de Celaya, Av. Tecnológico y A. García Cubas S/N, Celaya, Guanajuato, México, C. P. 38010. Tel. 01 461 6117575, Ext. 324 y Fax, Ext. 402
  • Claudia Ivonne Muñoz-Sánchez Departamento de Ingeniería Bioquímica, Instituto Tecnológico de Celaya, Av. Tecnológico y A. García Cubas S/N, Celaya, Guanajuato, México, C. P. 38010. Tel. 01 461 6117575, Ext. 324 y Fax, Ext. 402
  • Cristina Pérez-Pérez Departamento de Ingeniería Bioquímica, Instituto Tecnológico de Celaya, Av. Tecnológico y A. García Cubas S/N, Celaya, Guanajuato, México, C. P. 38010. Tel. 01 461 6117575, Ext. 324 y Fax, Ext. 402
  • Ramón Gerardo Guevara-González Ingeniería de Biosistemas. Facultad de Ingeniería. Universidad Autónoma de Querétaro. C. P 76010. Santiago de Querétaro, Querétaro. México
  • Irineo Torres-Pacheco Ingeniería de Biosistemas. Facultad de Ingeniería. Universidad Autónoma de Querétaro. C. P 76010. Santiago de Querétaro, Querétaro. México
  • Felipe Delgadillo-Sánchez Unidad de Biotecnología del Bajío. Campo Experimental Bajío- INIFAP. Carretera Celaya-San Miguel de Allende km 6.5, Celaya, Guanajuato, México
  • Mario Martín González-Chavira Unidad de Biotecnología del Bajío. Campo Experimental Bajío- INIFAP. Carretera Celaya-San Miguel de Allende km 6.5, Celaya, Guanajuato, México
  • Lorenzo Guevara-Olvera Departamento de Ingeniería Bioquímica, Instituto Tecnológico de Celaya, Av. Tecnológico y A. García Cubas S/N, Celaya, Guanajuato, México, C. P. 38010. Tel. 01 461 6117575, Ext. 324 y Fax, Ext. 402

DOI:

https://doi.org/10.29312/remexca.v3i7.1341

Palabras clave:

Allium sativum, gen hph de Escherichia coli Sclerotium cepivorum, señales de expresión de Aspergillus nidulans, pudrición blanca

Resumen

La pudrición blanca, una de las enfermedades más preocupantes para los productores de ajo (Allium sativum), es causada por el hongo fitopatógeno Sclerotium cepivorum Berk. Con el fin de desarrollar procedimientos de biología molecular para el hongo, en este trabajo se describe un método de transformación empleando fusión de protoplastos en presencia de polietilenglicol 3350 (PEG). Se empleó el plásmido pAN7-1 que confiere resistencia a higromicina B, el cual contiene el gen higromicina fosfotransferasa B (hph) de Escherichia coli bajo el promotor gliceraldehído fosfato deshidrogenasa (gpdA) y el terminador antranilato sintetasa (trpC) del hongo filamentoso Aspergillus nidulans. Las transformantes recuperadas en el medio de cultivo de regeneración papa dextrosa agar-sorbitol (PDA-S) en presencia de 200 μgmL-1 de higromicina B se analizaron amplificando un fragmento del gen bacteriano hph mediante PCR con oligonucleótidos específicos: Hig 1, Sentido 5 ́ GAC CTG CTG AGG TCC CTC 3 ́ y Hig 2, antisentido 5 ́ GCC CTC GGA CGA GTG CTG 3 ́. Se obtuvieron frecuencias de 12-18 transformantes de S. cepivorum por μg de ADN vector. Los resultados descritos en el presente trabajo contribuirán en la caracterización molecular de genes involucrados en el fenómeno de patogénesis de S. cepivorum sobre el ajo.

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Vol. 3, Núm. 7

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Publicado

2018-06-19

Cómo citar

Acosta-García Gerardo, Pantoja-Hernández Miguel Ángel, Muñoz-Sánchez Claudia Ivonne, Pérez-Pérez Cristina, Guevara-González Ramón Gerardo, Irineo Torres-Pacheco, Delgadillo-Sánchez Felipe, González-Chavira Mario Martín, y Lorenzo Guevara-Olvera. 2018. «Transformación Del Hongo fitopatógeno Sclerotium Cepivorum Berk Empleando fusión De Protoplastos». Revista Mexicana De Ciencias Agrícolas 3 (7). México, ME:1333-45. https://doi.org/10.29312/remexca.v3i7.1341.

Número

Vol. 3 Núm. 7 (2012)

Sección

Artículos

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