Evaluación de tres protocolos para la extracción rápida de ARN total de tejidos de Prosopis juliflora (SW)

  • Claudia Yared Michel-López Instituto de Ciencias Agrícolas-Universidad Autónoma de Baja California. Carretera a Delta s/n, ejido Nuevo León, Mexicali, Baja California, México. CP. 21705
  • Daniel González-Mendoza Instituto de Ciencias Agrícolas-Universidad Autónoma de Baja California. Carretera a Delta s/n, ejido Nuevo León, Mexicali, Baja California, México. CP. 21705
  • Omar Zapata-Pérez Departamento de Recursos del Mar-CINVESTAV-Unidad Mérida. Antigua carretera a Progreso km 6, Cordemex, Loma Bonita Xcumpich, Mérida, Yucatán, México. CP. 97310
  • Jorge Rubio-Piña Instituto Tecnológico de Mérida. Av. Tecnológico km 4.5, Mérida, Yucatán, México. CP. 97118
  • Lourdes Cervantes-Díaz Instituto de Ciencias Agrícolas-Universidad Autónoma de Baja California. Carretera a Delta s/n, ejido Nuevo León, Mexicali, Baja California, México. CP. 21705
  • Manuel de Jesús Bermúdez-Guzmán Campo Experimental Tecomán-INIFAP. Carretera Colima-Manzanillo km 35, Tecomán, Colima, México
Palabras clave: ARN, extracción, mezquites, PCR

Resumen

La extracción de ARN genómico de alta calidad para la amplificación por PCR, a partir de Prosopis spp., es complicada debido a la presencia de un alto porcentaje de metabolitos secundarios que se unen o coprecipitan con los ácidos nucleicos. En el presente estudio reportamos un protocolo modificado de sodio dodecil sulfato/fenol que incluye la eliminación de nitrógeno líquido en el proceso de maceración, β-mercaptoetanol en la extracción de tampón y paso de precipitación de etanol. Las proporciones de absorbancia A260/A280 del ARN aislado estaban en torno a 2 a 1.9, lo que sugiere que la fracción de ADN era pura y se puede usar para un análisis de PCR posterior. El ARN aislado por este protocolo es de calidad suficiente para aplicaciones moleculares; Esta técnica podría aplicarse a otros organismos que tienen sustancias similares que dificultan la extracción del ARN. Por último, esta propuesta representa una alternativa rápida, barata y eficaz para el aislamiento del ARN genómico de las hojas frescas de Prosopis spp., incluso en los laboratorios de baja tecnología.

Publicado
2018-09-24
Cómo citar
Michel-López, C., González-Mendoza, D., Zapata-Pérez, O., Rubio-Piña, J., Cervantes-Díaz, L., & Bermúdez-Guzmán, M. (2018). Evaluación de tres protocolos para la extracción rápida de ARN total de tejidos de Prosopis juliflora (SW). Revista Mexicana De Ciencias Agrícolas, 9(6), 1259-1267. https://doi.org/https://doi.org/10.29312/remexca.v9i6.788
Sección
Artículos